免疫蛍光染色（IF）

蛍光検出の手法を用いた免疫組織化学染色に関わる一連の作業をお引き受けするサービスです。お客様からのご要望に応じて、動物の解剖から切片の作製、染色の実施、報告書の作成までお引き受けいたします。
※ 明視野において特異性を確認できた抗体のみの対応となります。

ご依頼前に

ご依頼内容について以下の情報をお知らせください。

1次抗体情報

• 分子名
• 製品メーカー
• 製品品番（自家製抗体の場合は、濃度の記載をお願いします。）

サンプルについて

• サンプルの状態： パラフィン包埋ブロック、固定済み組織 など
• 動物種
• 組織名
• サンプル数
• 断面の指定： 注目部位や薄切方向（冠状断・矢状断）など、断面の指定がある場合はお知らせください。

※正常マウス・ラットにつきましては、当社でもご用意できますので、ご希望の組織をお知らせ下さい。
※サンプルの処理方法については、お問い合わせ下さい。

受託サービス内容

抗体検索

※ 多重染色の場合は、抗体の選択が必要となります。
※ 多重染色は、3分子までとなります。

明視野で染色条件検討

明視野での本試験

明視野で良好な結果が得られた場合のみ蛍光で本試験

※ 明視野での結果次第では、蛍光染色へ移行できないことがあります。

結果報告書の作成

※ 当社の蛍光顕微鏡は、共焦点レーザー顕微鏡ではございません。
※ バーチャルスキャン画像の提出は対応いたしておりません。

試験の実施例

明視野での染色条件検討

• 抗体：F4/80
• 検体：マウス肝臓

抗原賦活化処理３条件×抗体濃度の 計18条件を検討しました。

アイソタイプコントロールとして、rat IgG2bも同様の作業を行いまして、最も特異性を示す条件を決定しました。

		抗体濃度5μg／mL	抗体濃度１μg／mL	抗体濃度0.２μg／mL
熱処理	F4/80
	rat IgG2b アイソタイプコントロール
酵素処理	F4/80
	rat IgG2b アイソタイプコントロール
無処理	F4/80
	rat IgG2b アイソタイプコントロール

明視野での検討において特異性を確認できたので、蛍光法による本試験に進みました。

免疫蛍光染色 本試験

• 抗体： F4/80
• 検体：マウス肝臓
• 抗原賦活化法：酵素処理
• 抗体濃度：0.2μg/ml

F4/80	蛍光染色（赤：F4/80, 青:DAPI)
rat IgG2b	蛍光染色（赤：rat IgG2b, 青:DAPI)

蛍光顕微鏡の仕様

• 本体: ECLIPSE Ni-U (Nikon)
• 対物レンズ
  ・4x Plan Apo λ
  ・10x Plan Apo λ
  ・20x Plan Apo VC
  ・40x Plan Apo λ
  ・100x HP Plan Apo VC (oil)

• 蛍光装置光源: 蛍光LED照明システム D-LEDI
• カメラ: DS-Qi2 (1625万画素モノクロCMOSセンサー)
• 蛍光フィルター: DAPI, FITC, Texas Red, Cy5

染色例1

ラット脳 Iba-1 (green)  +  GFAP (red)	マウス脾臓 CD3 (green)  +  CD8 (red)

染色例２

マウスE18.5 αSMA (green)  +  CD31 (red) x20	x40

お見積もり及びご依頼方法

納期はご依頼内容を確認させて頂いたのちにご回答申し上げます。

03-5615-8857
受付時間： 10:00〜17:00（土日祝日休み）受託依頼の
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